2020年9月14日,国家知识产权局公开了由中国计量大学杨素、朱诚发明设计的专利-一种增强CRISPR/Cas9系统基因编辑效率的方法。
该发明涉及植物基因工程领域,该发明在PCR2后添加了一轮将U3和U6a的gRNA表达盒连接的PCR反应,然后再进行酶切连接,得到重组质粒;对U3表达盒与U6a表达盒连接,连接后的产物再与MH质粒连接,相对于现有技术同时将U3表达盒、U6a表达盒、MH质粒一起连接,本发明连接的难度远低于现有技术的连接难度,阳性克隆的比例大大增加,实现上述U3表达盒和U6a表达盒连接,重新设计了U3表达盒的下引物B2‑M和U6a表达盒的上引物B2’‑M,使B2‑M与B2’‑M的序列部分互补,这样可以使U3表达盒和U6a表达盒产物在第三轮PCR反应中通过粘性末端碱基互补连接起来。
附图:
更多专利信息请登录http://dsj.ipa361.com/index.php/Search?dwsign=WisdomResources&datasign=PatentInfo进行查询。
图文来源网络 如有侵权 请联系删除